摘要通过电导法测定经不同浓度脱落酸（ABA）水培的3种木樨科植物在3种低温条件下受伤害的程度，研究脱落酸对植物抗冻性的影响。结果表明：在其他条件相同时，冰冻时间越长，植物受伤害程度越大；在适合范围内，脱落酸浓度越大，植物受伤害程度越小，抗逆性越强；水培时间越长，伤害度越大。
　　关键词脱落酸；木樨科植物；低温；抗冻性
　　
　　环境胁迫如低温是限制植物生长发育的重要因素。近年来的研究表明，脱落酸（ABA）作为一种胁迫激素的观点已广被人们接受。脱落酸是一种具有倍半萜结构的植物激素。在植物体内，ABA不仅存在多种抑制效应，还有多种促进效应，在各种试验系统中，它的最适浓度可跨4个数量级，对于不同的组织，它可以产生相反的效应。本试验选取3种木犀科的植物，水腊（Ligustrum obtusifolium sieb.et zucc）、暴马丁香（S.amurensis）、雪柳（Fontanesia）作为试验材料，研究其对木樨科植物抗冻性的影响。
　　
　　1材料与方法
　　
　　1.1材料
　　水腊叶片，暴马丁香叶片，雪柳叶片。
　　
　　1.2试剂
　　脱落酸。
　　
　　1.3仪器
　　DDS-307型电导仪，电炉，冰箱，移液管，量筒，培养皿，烧杯，打孔器。
　　
　　1.4方法
　　先将3种植物枝条浸泡在不同浓度的脱落酸中，水培时间不同。再将植物叶片放在冰箱中冷冻不同的时间，最后用电导法测出叶片受伤害程度，根据其受伤害程度的不同，分析脱落酸对植物抗低温的影响。
　　
　　2试验步骤
　　
　　（1）配置50μmoL/L、150μmoL/L、300μmoL/L的脱落酸溶液各100mL于清洗干净的大矿泉水瓶中，将3种植物枝条放入水培，水培时间为2h、4h、8h。
　　（2）水培结束，取同一叶位的功能叶若干片，分成3份，一份为对照，一份放入冰箱-4℃冰冻1h，一份放入冰箱 -4℃冰冻3h，具体操作见图1。
　　（3）从冰箱中取出后，将处理组叶片与对照组叶片用蒸馏水冲洗2次，再用洁净滤纸吸净表面水分，用打孔器避开主脉打取叶圆片放入烧杯中，每杯放20片。
　　（4）将以上烧杯置室温下保持30min，其间要多次摇动烧杯。
　　（5）30min后，用电导仪测其初电导值（S1）。
　　
　　
　　（6）测毕，将各烧杯放在电炉上加热，直至水沸腾3min，以杀死植物组织，然后放置冷却到室温。并在室温下平衡10min，摇匀，测其电导值（S2）。
　　（7）在电导度测定中一般用普通蒸馏水，需要设一空白试管（蒸馏水作空白），测定样品时同时测定空白电导值，按下式计算相对电导度：
　　相对电导度（L）＝（S1—S0）·（S2—S0）-1（1）
　　S0—空白电导度，相对电导度的大小，表示细胞膜受伤害的程度。
　　由于对照（在室温下）也有少量电解质外渗，故可按下式计算由于低温或高温胁迫而产生的外渗，称为伤害度（或伤害性外渗）。
　　伤害度（%）＝（Lt－Lck）·（1－Lck）×100（2）
　　Lt－处理叶片的相对电导度，
　　Lck－对照叶片的相对电导度。
　　
　　3结果与分析
　　
　　3.1冰冻时间的影响
　　理论上，在其他条件相同时，冰冻时间越长，植物受伤害程度越大。但从我们的实验来讲，却有部分与之不符之处（见表1），这说明我们实验的部分数据测量出现了较大的误差，这也导致我们很难从庞杂的实验数据中获取正确的规律与结论。经分析我认为存在以下原因：
　　（1）材料之间存在差异。在采材料的时候，要尽量做到采集一致的枝条，取叶片时尽量保证取同一叶位，也尽量保证叶片的大小相同，同时还要保证叶片都是新生的、比较幼嫩的。但因实验耗费大量叶片，这点在实施过程中存在困难。枝条粗细稍有不同，直接影响其吸收ABA的能力。
　　
　　（2）实验仪器存在误差。有时工作量相当大，就要采用多台电导率仪同时测量，仪器之间存在误差。有的仪器读数不准，很难稳定下来，加大了误差。
　　（3）不同操作人员之间的操作习惯会导致误差。小组5个组员，在实验过程中各测了一部分数据，所有数据再整合到一起，会加大误差。此外，实验从早晨持续到晚上11时，组员比较疲劳，但在操作上却更熟练，这样也会导致前后数据会产生误差。
　　（4）实验过程中存在失误。比如未严格控制煮沸或摇晃振荡的时间，没有严格计时，左右相差30s，也影响了实验结果。
　　
　　3.2脱落酸浓度对植物抗逆的影响
　　理论上在适合范围内，脱落酸浓度越大，植物受伤害程度越小，抗逆性越强。通过雪柳得出的数据证明了这一点（见表2、表3）。
　　
　　3.3水培时间对植物抗逆性的影响
　　以暴马丁香为例研究水培时间对植物抗逆性的影响，结果表明：水培时间越长，伤害度越大，我们认为这可能是因为离体时间太长导致的结果。
　　　
　　4注意事项
　　
　　植物组织受到逆境伤害时，由于膜的功能受损或结构破坏，其透性增大，细胞内各种水溶性物质包括电解质将有不同程度的外渗，将植物组织浸入无离子水中，水的电导度将因电解质的外渗而加大，伤害愈重，外渗愈多，电导度的增加也愈大。此方法十分便捷而有效，但需要注意的事项较多：①取材。材料新鲜、健康，并且生理生态状况相近。②仪器。最好固定，避免测量仪器间存在的差别而干扰实验的结果。③操作人员。细致耐心，且要对实验流程十分清楚，操作要遵从实验规则。④实验过程。单因子分析时，要尽量使其他因素保持一致；比如，实验步骤（6）中杀死植物组织这一步，加热煮沸时间要一致，我们就是因为这一步没有把握好，所以给实验的结果带来了负面的影响。
　　本实验较为复杂且环环相扣，每一步的操作都有可能对实验的结果产生重要的影响。因此，在做此实验中应注意每一细节，尽量避免因一步的失误而造成整个实验的失败。
　　本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。
　　

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