花叶络石组织培养快繁技术
1、花叶络石简介
1. 1植物名称花叶络石汗(TraChelospermurnjasmlnoidesF1ame)。络石又叫石龙藤,为夹竹桃科的常绿藤本,长有气生根,常攀缘在树木、岩石、墙上生长;初夏5月开白色花,形如“万”字,有芳香。花叶络石,叶上有白色或乳黄斑点,并带有红晕。茎有不明显皮孔,小枝、叶下面和嫩叶柄被短柔毛,稍老枝叶无毛。叶革质,椭圆形至孵状随圆形或宽倒卯形,长2—6cm,宽1—3cm。老呈近绿色或淡绿色,第一轮新叶红色,每枝多数为一对,少数2—3对粉红叶,第二对到第三对为纯白色叶,在纯白叶与老绿叶间有数对花叶,多数叶脉部分呈白色,叶面配有不规则白色斑块,从新叶到老叶白色成份逐渐减少。
1.2栽培范围络石自然分布于我国东南部,黄河以南地区均有分布。从目前浙江省的金华、萧山等地栽与盆栽试验初步分析,野外作为彩叶地被植物、选景植物栽培可以在其原种范围内进行。如作为室内盆栽观赏植物,则可用于任何地区,尤其在光照条件较好的地区更为适宜。
1. 3观赏价值与园林应用花叶络石的观赏价值在于其三个层次的叶色,由红、粉红、纯白和花白、绿叶所构成的色彩群,极似盛开的一束花朵,极其艳丽、多彩。因属新叶的色彩而非花色,其观赏期一年四季,尤其是春、夏、秋三季,相对来说冬季因不长新叶,观赏效果要差一些。为达到最佳的色彩效果,需要通过强度修剪以促进萌枝,形成紧密型植株丛,促进新叶生长。在园林上,它是极其美丽的地被植物,可以作为常年“开花”植物用于各种花径布置;同时它又是优良的盆栽植物材料,可以代替目前公园、现代设施上盆花布景,以克服盆花观赏期短、经常换用的高成本缺点。此外,也是可用作家庭盆栽的优良植物
1. 4繁殖花叶络石引种成活率达65%,经试验繁殖发现,花叶络石可以在一年中任何季节扦插繁殖,春季与秋季的生根率均可达80%以上,夏季扦插对于部分生长太嫩的枝条易腐烂,但达到半木质化的枝条均可生根成活。但是通过营养繁殖的方式经多代繁育后,容易出现叶色退化,种苗颜色不稳定;通过组织培养法繁殖花叶络石技术,组培过程中即可出现花叶,遗传性状稳定。
2材料类别当年生新梢。
3培养条件基本培养基为HS。(1)诱导休眠芽萌动培养基MS+NAA0.05mg/L-1(单位下同)+6-BA2.0;(2)芽增殖培养基:MS+IAA0.2+6- BA1.5;(3):隆苗培养基:MS+NAA0.5+6-BA0.5;(4)生根培养基:l/2MS+NAA0.5+IBA0.2。以上培养基均附加 20g/L-1蔗糖、7g儿-1琼脂,PH6.0-6.2;光照度为2000~2500lx,每天光照14h;培养温度白天为25~30℃,夜间为15— 20℃。
4生长与分化情况
4.1无菌材料的获得选取一年生幼苗生长健;仕无病虫害的母株,切取当年萌发之春梢先端,去除叶片,保留叶柄,将枝条截成2—3cm的小段。消毒时先用10%洗衣粉溶液浸泡15min,然后用流水;中洗30min。在无菌条件下用75%乙醇溶液浸泡杀菌30S,用0.1%的升汞溶液加吐温—20杀菌3、5、10、15min。0.1%升汞溶液灭菌效果随杀菌时间延长而提高,杀菌时间少于10min则无菌苗获得率小于13.5%,杀菌15min”无菌苗获得率为23.7%,外植体死亡率达33.3%。随着杀菌时间的延长升汞对植物材料的毒害作用加剧,以0.1%升汞溶液杀菌时间10—15min为宜。用无菌水;中洗3—5遍后,接种到MS固体培养基上。
4.2芽的诱导将接种后20d的无菌苗转移至培养基(1)上,5—7d茎尖开始萌动,10d腋芽萌动,芽逐渐长大,继续培养20d,茎段上所有腋芽均萌发成侧枝。侧枝生长正常,叶片深绿色,茎基部愈伤组织较少,黄绿色。
4. 3试管苗的增殖将试管苗侧枝分割成2—3芽为一段,接种于培养基(2)上。10d后茎段叶芽萌动,30d长成大量侧枝,并有大量双生枝和三生枝产生。接种茎段形成具有5—8侧枝的丛生苗,平均增殖5.8倍。试管苗节间明显伸长,幼嫩叶片茎杆均呈淡红色,叶片大,茎杆较粗,组织不充实,茎基部愈伤组织大。以后每30d继代1次,经3—4次继代试管苗出现玻璃化现象。
4.4壮苗培养将经增殖培养的试管苗每继代3—4次后转移至培养基(3)上。40d后形成大量侧枝,平均每茎段4—6侧枝,侧枝平均长1.8cm,平均增殖3.1倍。基本无双生枝或三生枝。侧枝生长健;D,组织充实,叶色深绿,基部愈伤组织小,黄绿色,无玻璃化现象。
4.5根的诱导将生长健壮、长度大于1.2cm的侧枝分割,转移至培养基 (4)上。提高光照度至2500—3000lx,延长光照时间至每天16h。培养15d后开始有根原基形成,根原基形成后即可炼苗。20—25d调查生根情况,生根率73%,每苗平均生根l—2条。
4.6炼苗移栽将生根试管苗带瓶移人栽培温室,培养1周。当根长0.5— 1omb寸,打开瓶盖炼苗3—5d,将生根苗取出,洗净根部培养基,栽植于育苗穴盘中。以黑泥碳为基质,温度控制在20—25℃之间,湿度为85%— 95%左右,20d即可成活,成活率达73%以上。
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