新红星苹果花芽蛋白质提取及双向电泳的改良方法
来源:果树学报 作者:朱志勇 曹尚银 徐小彪 郭俊英 陈玉玲 薛华柏 日期:2007-04-01
摘 要:以新红星苹果花芽为材料,探索适合蛋白质的提取方法及其双向电泳的条件。采用物理和化学2种方法充分裂解植物组织细胞,并用低温操作加入PVP等去除植物大量的酚类物质,最后离心去除不溶性杂质的苹果蛋白质组双向电泳(2-DE)样品制备方法,第1向为ISO~DALT等电聚焦,第2向为垂直平板SDS-PAGE。通过对样品制备、双向电泳参数的选择及染色等方面进行优化,电泳图谱可分辨出蛋白质斑点数在519个以上,蛋白质相对分子质量约为14.0~97.0 ku,主要分布为14.0~67.0 ku;等电点约为3.5~9.0,主要分布在4.0~7.0。
关键词:苹果;蛋白质;双向电泳
中图分类号:S661.1 文献标识码:A 文章编号:1009-9980(2007)04-549-04
随着功能基因组学的兴起,蛋白质组学(proteomics)技术已成为生命科学研究的重点,同时给果树花芽分化分子机理研究带来了新的机遇。双向电泳技术是蛋白质组研究的3大关键核心技术之首。其基本原理是:第1向为等电聚焦(18081ectrofocusing,IEF),根据蛋白等电点不同进行分离;第2向为SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),是基于蛋白质亚基分子质量不同,将第1向分离后的蛋白质进一步分离。蛋白质经过电荷和质量的2次分离后,可以得到蛋白质等电点和分子量的信息。
“注:本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文”
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