云南红豆杉紫杉烯合成酶基因克隆、序列分析与植物表达载体的构建
2005/1/1 来源:生命科学研究 作者:梁素钰 和丽岗 郑学勤


  摘 要:利用分段RT-PCR法成功地从云南红豆杉叶片总RNA中分离出两条长约1.4kb和1.5kb的cDNA片段,克隆到pUCm-T载体中,序列拼接分析表明,该cDNA片段与Wildung M R 等发表的紫杉三烯合成酶基因编码区2568bp有41个核苷酸不同,同源性为98.42%,具有编码862个氨基酸蛋白质的能力。为了检测所克隆的基因编码产物是否具有活性,并进一步制备抗体以便于将来转基因植物的检测,构建了一个酵母表达载体GAPA-T14;为了转化植物构建了两个具有不同启动子的植物表达载体,PBI121-T14(含35S启动子)和pBIH-T14(在pBI121的基础上以胶乳特异启动子)。
  关键词:云南红豆杉;紫杉烯合成酶;植物表达载体;cDNA克隆;紫杉酶
  中图分类号:Q78
  文献标识码:A
  文章编号:1007-7847(2005)01-0024-05

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