关键词 蒲公英 生药颗粒 咖啡酸 高效液相色谱法 浸膏得率
　　
　　蒲公英为菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand-Mazz.、碱地蒲公英Taraxacum sinicum Kitag.或同属数种植物的干燥全草。蒲公英为常用清热解毒的中药，药理实验表明具有广谱抗菌作用，临床用于各种急慢性感染。其中咖啡酸为主要的有效成分，测定其含量可以有效地评价蒲公英质量^［1］。目前中药是以传统饮片的方式入汤剂进行使用，其主要优点是制法简便，吸收快，可随症组方^［2］。但传统饮片具有不利于机械化包装、浪费药材严重等缺点^［3］。丁青龙等^［4］探索了黄芪生药袋包颗粒替代传统中药饮片的研究，认为生药袋包颗粒具有煎出率高等特点。笔者用高效液相色谱法（HPLC）对蒲公英生药不同粒径颗粒及饮片汤剂进行比较研究，通过含量测定比较，筛选出与饮片含量相近或较高的颗粒，为进一步研究蒲公英袋包颗粒替代饮片入煎汤剂提供实验依据。
　　
　　1 仪器与试药
　　1．1 仪器：高效液相色谱仪Varian prostar 230(三元梯度泵)、prostar330(二极管阵列检测器)、prostar410(自动进样器)，十万分之一天平BP211D(sartorius)，超声波清洗器KQ3200DB(昆山市超声仪器有限公司)，隔膜真空泵(津腾)，真空干燥箱2KB2T(上海实验仪器厂)。
　　1．2 试验用药：蒲公英由浙江中医药大学中药饮片厂提供，经陈锡林副教授鉴定为蒲公英生药。咖啡酸对照品购自中国药品生物制品检定所，批号200212。甲醇为色谱纯，磷酸、磷酸二氢钠和甲酸为分析纯，水为重蒸去离子水。
　　
　　2 方法与结果
　　2．1 蒲公英生药颗粒的制备：取蒲公英干燥品，粉碎后，按照《中国药典》2005版一部进行过筛，制得1号颗粒(最粗粉，全部过一号筛但混有能通过三号筛的不超过20％)、2号颗粒(粗粉，全部过二号筛但混有能通过四号筛的不超过40％)、3号颗粒(中粉，全部过四号筛但混有能通过五号筛的不超过60％)，备用。
　　2．2 浸膏得率测定：取各粉碎粒度的颗粒及饮片100g，第一次加入10倍量水，第二次加入8倍量水提取，各提30分钟，合并两次提取液并定容至1000ml，备用。各取200ml，蒸干。重复3次，测浸膏得率并计算变异系数（RSD）。不同粒径颗粒及饮片的浸膏得率等相关数据见表1。
　　
　　2．3 咖啡酸含量测定：分述如下。
　　2．3．1 色谱条件：色谱柱：YMC-ODS-A柱(250×4．6mm，5μm)；流动相：甲醇-磷酸盐缓冲液(23∶77)，流速1．0ml／min，检测波长323nm，柱温40℃。以咖啡酸为对照品，采用外标法峰面积定晕，按咖啡酸峰测定柱效，理论塔板数为17177。
　　2．3．2 对照品溶液制备：精密称定在110℃干燥至恒重的咖啡酸对照品10．0mg，置100ml量瓶中，加入甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密吸取1．0ml，置10ml棕色量瓶中，加入甲醇并稀释至刻度，摇匀，即得10μg／ml的对照品溶液。
　　2．3．3 供试品溶液制备：取2．2项下的提取液，各精密吸取5ml，置具塞锥形瓶中，精密加入5％甲酸的甲醇溶液5ml，称定重量，超声处理30min，放冷，再称定重量，用5％甲酸的甲醇补足减火的重量，摇匀，离心，取上清液，置棕色量瓶中，即得。
　　2．3．4 标准曲线与线性范围：精密吸取对照品溶液，分别进样1μl、2μl、5μl、8μl、10μl、15μl、20μl。按上述色谱条件测定，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，其对应的对照品进样量为横坐标，进行回归计算，得到咖啡酸的回归方程和相关系数为：Y=3．21×104X-1．91×105，r=0．99998。实验结果表明：本方法中咖啡酸在0．01～0．2μg范围内与峰面积的线性关系良好。
　　2．3．5 样品含量测定：精密吸取供试液注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件进行测定，重复3次，记录色谱图(见图1)，测定咖啡酸的含量并计算变异系数（RSD），测定结果见表2。
　　
　　3 讨论
　　从表1和表2可得，蒲公英制成生药颗粒后，1号、2号和3号颗粒浸膏得率和咖啡酸含量均高于饮片含量，1号颗粒与饮片相近。且随着颗粒的变细，浸膏得率和咖啡酸含量均稳步增高。说明随着颗粒的变细，其成分易于煎出，与预期一致。从数据上分析1号颗粒更符合我们的要求，因其两项指标均高于饮片且在数值上与饮片最为接近。
　　
　　4 参考文献
　　［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典一部［M］.北京:化学工业出版社,2005:244.
　　［2］范碧亭,刘汉清,狄留庆,等.中成药学［M］.南京:南京大学出版社,1991:5.
　　［3］董占军,何洪林.无纺布袋包煎法改进中药汤剂的可行性和优越性［J］.中国药房,1996,7(1):48.
　　［4］丁青龙,狄永良.黄芪生药袋包颗粒和免煎颗粒及其饮片汤剂的对比研究［J］.现代中西医结合杂志,2000,9(20):1980-1982.
　　收稿日期 2007-01-06